ブルセラ抗体ELISAキット

仕様

 

テスト手順と解釈

 

ステップ1テスト手順

1.1洗浄ソリューション準備

WORKING濃度 w灰色の液体：使用する前に、洗浄溶液を室温（20-25程度）に復元し、均等に振って均一にする必要があります。次に、精製水（たとえば、5mL濃縮洗浄溶液を95ml精製水に加えます）で濃縮洗浄溶液を20倍希釈し、希釈洗浄液を2-8程度7日間保存できます。

1.2サンプル準備

whole動物の血液を摂取し、4000rpmで10分間遠心分離し、上清を収集しました。血清は、溶血なしで自然に凝固することもできます。

実験的な反応時間が一貫していることを確認するために、サンプルサイズが大きい場合。希釈プレートの1：1（70ul血清サンプル+ 70 UL抗体作動溶液）の1：1の抗体作業溶液と血清サンプルを混合します。陰性対照と陽性対照は、血清サンプルと同じです。

1.3テスト手順

einzyme標識マイクロプレート（サンプルの数に従って、数回分解して使用できます）を取り、それぞれ2つのウェルをネガティブコントロールとポジティブコントロールにセットアップし、酵素ラベルマイクロプレートに100ULの予期化された混合物を追加します。シーリングプレートフィルムを使用してプレートを覆うために、井戸のサンプルをそっと振って、37度で30分間インキュベートします。

シーリングプレートフィルムを開き、プレートの溶液を井戸の溶液を振り払い、300µlの作業濃度を各井戸に洗浄し、井戸に液体を捨てます。上記の手順を5回繰り返し、最終的にきれいな吸収性紙で乾かします。

③Diluted酵素コンジュゲート:酵素コンジュゲート（50×）を50回希釈します（たとえば、20ul酵素コンジュゲート濃縮{+ 980 ul希釈液1、必要な特定の量はテストサンプルの数に従って計算されます）。

100µlの酵素コンジュゲートを各ウェルに加算し、プレートを覆い、37度で30分間インキュベートします。

enzymeプレートを洗浄すると、特定の操作は上記と同じです。

各ウェルに100µlの基板溶液を追加し、プレートを覆い、光から37度離れたところに10分間インキュベートします。

50µlの溶液を各ウェルに停止し、5分以内に結果を決定します。

 

ステップ2結果の解釈

 

各ウェルのOD450値は、96-ウェルマイクロプレートリーダーで読み取られました。

2.1検証

 

陽性対照の平均OD45 0 nm値は0.35未満であり、ネガティブコントロール/陽性対照の平均OD450NM値は3.5以上でした。実験結果は有効でした。それ以外の場合、テストを繰り返す必要があります。

2.2計算方法

各サンプルについて、修正されたサンプルと制御値を使用して、次のようにPi（ブロッキング）を計算します。

2.3結果の解釈

pi <20％の場合、それは陰性と判断されます。

pi> 30％の場合、陽性と判断されます。

Pi以下が30％以下のPi以下が20％少ない場合、それは疑わしいと判断され、1週間後にサンプリングを繰り返してテストすることを提案します。

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